Una especie nueva de rana del género Chiasmocleis (Microhylidae: Gastrophryninae) de la Cordillera del Cóndor, Ecuador

Keywords: Chiasmocleis parkeri, Cordillera del Cóndor-Ecuador, Ecological Information, Microhylidae, New Species, Phylogeny, Syncope.

Abstract

We describe a new species of frog of the genus Chiasmocleis from the montane forests of southeastern Ecuador, at the western slopes of Cordillera del Cóndor, between 1,224‑1,630 m of elevation. Based on new sequences of mitochondrial and nuclear DNA we present phylogenetic relationships of the new species and its congeners. The phylogeny shows a close relationship to C. antenori, C. carvalhoi, C. magnova and C. tridactyla. The new species is part of a clade of species that were previously assigned to the genus Syncope. This clade has a sister relationship to a clade that contains all remaining species of Chiasmocleis. The new species differs from its congeners by its reddish-brown to dark-brown (sepia) dorsum with minute yellowish-white spots. Chiasmocleis parkeri sp. nov. is similar to Chiasmocleis antenori in lacking digit I of both hands and feet but Chiasmocleis parkeri differs in coloration, arrangement and size of pale spots, and the absence of a pale line in the canthal region. We describe the calls, which are characterized by having non-pulsed notes, and we provide ecological data from the type locality and adjacent areas.

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Author Biography

Ana de Lourdes Almendáriz Cabezas, Escuela Politécnica Nacional Instituto de Ciencias Biológicas
Instituto de Ciencias Biológicas, Museo de Historia Natural Gustavo Orcés V.

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Published
2017-03-16
How to Cite
Almendáriz Cabezas, A., Brito M., J., Batallas Revelo, D., Vaca-Guerrero, J., & Ron, S. (2017). Una especie nueva de rana del género Chiasmocleis (Microhylidae: Gastrophryninae) de la Cordillera del Cóndor, Ecuador. Papéis Avulsos De Zoologia, 57(10), 119-136. https://doi.org/10.11606/0031-1049.2017.57.10
Section
Original Article

INTRODUCCIÓN

La familia Microhylidae se halla entre las cinco familias de anuros más diversas, comprende 586 especies distribuidas en 61 géneros (AmphibiaWeb, 2016). La familia incluye especies de hábitos fosoriales, terrestres y arborícolas; es de amplia distribución, principalmente en las zonas tropicales (pocas en zonas temperadas) y notablemente más diversa en Madagascar y Australasia (van der Meijden et al., 2007; AmphibiaWeb, 2016).

Peloso et al. (2015) reconocen 13 subfamilias de Microhylidae: Adelastinae (América del Sur), Asterophryinae (Sudeste Asiático, Papua New Guinea y extremo norte de Austrália), Chaperininae (Sudeste Asiático), Cophylinae (Madagascar), Dyscophinae (Madagascar), Gastrophryninae (América del Norte y del Sur), Hoplophryninae (centro occidente de Africa), Kalophryninae, Melanobatrachinae, Microhylinae (Centro y Sudeste de Asia), Otophryninae (América del Sur), Phrynomerinae (Norte de Africa) y Scaphiophryninae (Madagascar). En la subfamilia Gastrophryninae, se incluyen once géneros: Arcovomer, Chiasmocleis, Ctenophryne, Dasipops, Dermatonotus, Elachistocleis, Gastrophryne, Hamtophryne, Hypopachos, Myersiella y Stereocyclops (AmphibiaWeb, 2016).

Los microhylidos exhiben una variedad de patrones reproductivos, incluyendo larvas acuáticas, desove en fitotelmatas y desarrollo directo. Morfológicamente, el cuerpo y las patas posteriores son robustos y el hocico es corto.

Frost et al. (2006) determinaron el nivel más alto de filogenia dentro de Ranoidea y propusieron una nueva clasificación de subfamilias para Microhylidae y Arthroleptidae. Posteriormente, otros autores apoyaron esta clasificación (Roelants et al., 2007; Pyron & Wiens, 2011). Una clasificación alternativa para los microhilidos, basada en un análisis filogenético detallado que incluyó 20 especies del género Chiasmocleis y ocho de Syncope, recuperó a los dos géneros como especies hermanas (de Sá et al., 2012). Recientemente, Peloso et al. (2014) propusieron un cambio a la taxonomía de los microhilidos: el género SyncopeWalker, 1973 fue considerado como sinónimo junior del género ChiasmocleisMéhely, 1904, para mantener la monofilia de este género. En este trabajo se reconocen 16 especies distribuidas en la Amazonía y el Escudo Guayanés.

El género Chiasmocleis

Las similaridades osteológicas entre Chiasmocleis y Syncope habían sido documentadas por Walker, 1973; Duellman & Mendelson III, 1995 y Moravec & Köhler, 2007; adicionalmente, los análisis morfológicos sugirieron que los dos géneros están cercanamente relacionados (Zweifel, 1986; Wild, 1995). Posteriormente se realizaron estudios moleculares (van der Meijden et al., 2007, Pyron & Wiens, 2011) los cuales identificaron la monofilia de C. hudsoni y C. shudikarensis.Trueb et al. (2011) apoyaron la estrecha relación filogenética entre Chiasmocleis y Syncope basados principalmente en la similitud morfológica de la cintura pectoral. Sin embargo, de Sá et al. (2012) reasignaron tres especies de Chiasmocleis (C. hudsoni, C. bassleri y C. magnova) al género Syncope para evitar la polifilia de Chiasmocleis. Dos rasgos morfológicos afines apoyaron el arreglo propuesto por de Sá et al. (2012), “pérdida de dos vértebras y reducción o pérdida de los dedos manuales I y IV”, patrón que se observa en los adultos de Chiasmocleis. Estas características, conjuntamente con los análisis moleculares, evidencian afinidades filogenéticas entre estos dos clados (Peloso et al., 2014). La reevaluación de la sistemática de las especies amazónicas y del Escudo Guayanés de los géneros Chiasmocleis y Syncope, realizada por estos autores incluyó un análisis integrativo de la morfología, la acústica y la filogenia de tres genes (dos mitrocondriales y uno nuclear) para establecer que el género Syncope es un sinónimo junior de Chiasmocleis.

Actualmente se reconocen 29 especies del género Chiasmocleis (Frost, 2016) y en Ecuador se registran cinco especies: C. anatipes, C. antenori, C. bassleri, C. tridactyla y C. ventrimaculata (Ron et al., 2016).

Por el tamaño, la coloración y los hábitats donde son activas las ranas del género Chiasmocleis, no resulta muy fácil la colecta de estos anuros. Entre los años 2008 y el 2012 se realizaron evaluaciones de herpetofauna en el alto Río Machinaza, en alturas que fluctúan entre 1.200 y 2.200 msnm. Los muestreos extensivos llevaron al descubrimiento de varias especies nuevas de anuros (Almendáriz et al., 2012; Brito et al., 2014), una de ellas corresponde al género Chiasmocleis y constituye la sexta especie del género en el Ecuador, la misma que se describe en el presente artículo conjuntamente con la filogenia, cantos de los machos y anotaciones sobre el hábitat.

MATERIALES Y METODOS

Los ejemplares provienen de varias localidades de la zona meridional de la Cordillera del Cóndor. En el Alto Río Machinaza se efectuaron ocho campañas de campo y el material de estudio se colectó en varios puntos cercanos a la localidad tipo (Sachavaca-Naranjilla: 03°43’55.64”S; 78°29’14.18”O, 1.395 msnm), en un rango altitudinal que va desde 1.224-1.630 msnm. Las localidades pertenecen al Cantón Yantzaza, Provincia Zamora Chinchipe; dos paratipos (QCAZ) corresponden a colectas realizadas en los cantones El Pangui y Nangaritza de la misma provincia, a una altitud de 1.300 msnm. Los datos de latitud y longitud se basaron en el datum WGS84 y fueron registrados con un Garmin eTrex Summit* HC. Los especímenes fueron preservados según los protocolos citados en Simmons (2015).

Para la descripción de la morfometría y terminología del holotipo y paratipos se usan los criterios de Peloso et al. (2014): LRC (largo: rostro cloaca); LCA (longitud de la cabeza: desde el hocico hasta el ángulo de la mandíbula); ACA (ancho de la cabeza: entre las comisuras de la mandíbula); DOJ (diámetro del ojo: entre las esquinas del ojo); DIO (distancia interorbital: entre las esquinas de los ojos); DIN (distancias internarial: entre las aberturas nasales); DON (distancia ojo-nostril: entre la esquina anterior del ojo y la abertura nasal); LMU (longitud del muslo: desde la mitad de la cloaca hasta el margen posterior de la rodilla flexionada); LTI (longitud de la tibia: desde el margen externo de la rodilla hasta el talón); LPI (longitud del pie: desde la articulación tibio tarsal hasta la punta del dedo IV), ADIV (ancho del disco del dedo IV pedal). Las medidas se tomaron con un calibrador digital Truper bajo un estereomicroscopio Olympus SZ (con una aproximación ± 0.01 mm). Para determinar la forma de la cabeza y perfil del hocico usamos la terminología de Savage (2002). La determinación del sexo se realizó por: coloración de la garganta e inspección directa de las gónadas y de las hendiduras vocales.

La descripción de la coloración en vida se basa en las notas de campo y fotografías de los colectores, siguiendo la terminología del catálogo de colores de Köhler (2012).

Las fotografías del holotipo en preservado, detalles de la mano y pie y de estructuras anatómicas fueron tomadas en un estereomicroscopio Olympus SZ61 con el acople de una cámara digital Lumenera Infinity1-2c. Para visualizar las características osteológicas, particularmente de las cinturas escapular y pélvica, se sometió a limpieza con coleópteros (Dermestes carnivorus) al ejemplar MEPN 13680 y a diafanización-tinturado con alizarina al MEPN 14221, adicionalmente se tinturaron con azul de metileno diluído en alcohol, las palmas de las manos y plantas de los pies para identificar de mejor manera los tubérculos subarticulares.

El material examinado se encuentra depositado en la colección de Herpetología del Museo de Historia Natural Gustavo Orcés, Instituto de Ciencias Biológicas de la Escuela Politécnica Nacional (MEPN), Museo de Zoología de la Pontificia Universidad Católica del Ecuador (QCAZ) y en la División de Herpetología del Museo Ecuatoriano de Ciencias Naturales (DHMECN).

El canto del ejemplar MEPN 14223, se registró con una grabadora digital Zoom H4n, conectada a un sistema modular Sennheiser K6-C, acoplado a un micrófono de cabezal Sennheiser ME 66. La temperatura y humedad ambientales se registraron con un termómetro ambiental marca Springfiel. Para los análisis acústicos se utilizó el programa Adobe Audition CS6 a una frecuencia de muestreo de 44.1 kHz y 16 “bits” de resolución (Almendáriz & Batallas, 2012; Batallas & Brito 2014a); para la diagramación del oscilograma y sonograma se utilizó el programa Raven 1.4 (Charif et al., 2010) a 256 puntos de resolución de la transformación rápida de Fourier (FFT). La grabación está depositada en la colección de Herpetología del MEPN con el número: Cantos MH-MEPN003.

Los parámetros que se analizaron fueron: (1) Frecuencia dominante: frecuencia de mayor energía medida a lo largo de todo el canto y en todos sus componentes: notas, pulsos y demás; (2) Notas/canto: número de unidades acústicas de un determinado patrón de amplitud reconocido en los cantos; (3) Notas/segundo: tasa de repetición de las notas en el lapso de un segundo; (4) Duración del canto: tiempo desde el inicio hasta el final de un canto, medido con el analizador de forma de onda, (5) Duración de las notas: tiempo desde el inicio hasta el final de una nota, medido con el analizador de forma de onda, (6) Intervalos entre notas: tiempo transcurrido entre nota y nota. Las definiciones y mediciones realizadas de los parámetros acústicos, adoptan la terminología de Angulo (2006), Batallas & Brito (2014b), Cocroft & Ryan (1995), Díaz & Cádiz (2007), Duellman & Pyles (1983) y Toledo et al. (2015).

Extracción, secuenciación y amplificación de ADN

El ADN total fue extraído de tejido de hígado preservado en etanol al 95% con el protocolo de guanidinatiocianato. Aplicamos la reacción en cadena de la polimerasa 10 (PCR) para amplificar los genes mitocondriales citocromo oxidasa I (COI), RNA ribosomal 12S y 16S y el gen nuclear oncogen celular mielocitomatosis exon 2 (CMYC). Los cebadores utilizados fueron MVZ59, MVZ50, MVZ50-d, 12L1, 12L6, 12Sm, 16H36E, 16L19, 16Sa, 16Sbr-H, 16sc, 16Sh para 12S y 16S (Goebel et al., 1999; Graybeal, 1997; Heinicke et al., 2007; Palumbi et al., 1991; Pauly et al., 2004; Pramuk, 2006), LCO1490 and HCO2198 para COI (Folmer et al., 1994) y cmyc1U y cmyc-ex2 R para CMYC (Crawford, 2003). La amplificación se llevó a cabo con protocolos estándar. Los productos de PCR fueron secuenciados por el Grupo de Secuenciación Macrogen (Macrogen Inc., Seúl, Corea). La información asociada a las nuevas secuencias se lista en la Tabla 2.

TABLA 1::
Modelos de evolución y esquema de partición seleccionados por PartitionFinder v. 1.1.1 para los loci empleados en el análisis filogenético.
Subset Modelo seleccionado Particiones del subset
1 GTR+I+G 16S-12S
2 JC+I BDNF posición 1
3 JC+I BDNF posición 2, Histona H3 posición 2, SIA posición 2
4 K80+G BDNF posición 3
5 GTR+G CMCY posición 3, Tirosinasa posición 3
6 SYM+I+G CMCY posición 1, CMCY posición 2, Tirosinasa posición 1, Tirosinasa posición 2
7 GTR+G COI posición 3
8 SYM+I+G COI posición 1, SIA posición 1
9 F81+I COI posición 2
10 HKY+G Histona H3 posición 3, SIA posición 3
11 F81+I+G 28S, Histona H3 posición 1

TABLA 2::
Números de accesión Genbank para las secuencias de ADN usadas en el análisis filogenético.
No. de voucher Especie No. de accesión GenBank
Cmyc CO1 12S 16S
QCAZ 56275 Chiasmocleis antenori - - KY465735 KY465739
MEPN 14223 Chiasmocleis parkeri sp. nov. KY465743 KY465745 KY465734 KY465740
QCAZ 41441 Chiasmocleis parkeri sp. nov. KY465742 KY465744 KY465736 KY465738
QCAZ 55408 Chiasmocleis tridactyla - - KY465737 KY465741

Análisis filogenético

Para ampliar el muestreo de especies y de genes adicionamos secuencias del GenBank publicadas por Funk & Cannatella (2009), de Sá et al. (2012), Blackburn et al. (2013), Peloso et al. (2014) y Peloso et al. (2015). Incluimos la mayoría de géneros de Gastrophryninae y las secuencias disponibles de Chiasmocleis. Como grupo externo usamos especies de los géneros Kaloula, Lithobates, Microhyla, Scaphiophryne y Tomopterna. Además de los loci secuenciados por nosotros (ver sección anterior), también incluimos secuencias de los genes nucleares Factor Neurotrófico Derivado del Cerebro (BDNF), Histona H3, homólogo Siete in Absentia (SIA1) y Tirosinasa. La matriz final tuvo 6.008 pb y 147 terminales.

La alineación preliminar de las secuencias se hizo con el software MAFFT 6.814b con el algoritmo L-INS-i (Katoh et al., 2002). Regiones de alineación ambigua en la matriz fueron corregidas manualmente en Mesquite 2.72 (Maddison & Maddison, 2009). Los árboles filogenéticos fueron obtenidos usando máxima verosimilitud como criterio de optimalidad. Debido a que los loci analizados pueden evolucionar bajo procesos distintos, es posible que no se ajusten a un solo modelo evolutivo. Por lo tanto, dividimos la matriz de datos en 20 particiones a priori, una para 12S-16S, otra para 28S y 18 por cada una de las tres posiciones codantes de los seis genes codificantes. El mejor modelo para cada partición y el mejor esquema de partición fueron seleccionados con la aplicación PartitionFinder v. 1.1.1 (Lanfear et al., 2012). La búsqueda filogenética se hizo con el programa Garli v. 2.0 (Zwickl, 2006). Se llevaron a cabo 40 réplicas de la búsqueda, 20 empezando por un árbol al azar (comando streefname = random) y 20 empezando por un árbol escalonado (streefname = stepwise). Los parámetros de búsqueda fueron los del programa por omisión excepto por genthreshfortopoterm (= 200000) y limsprrange (= 10). Se comparó los valores de verosimilitud entre las 40 réplicas para determinar si las búsquedas convergían en árboles con verosimilitud similar. En caso de convergencia de más de 75% de las búsquedas (valores de verosimilitud con menos de una unidad de diferencia) se asumió que la búsqueda había sido exhaustiva. El soporte de las ramas fue evaluado con 100 pseudoréplicas bootstrap. Cada pseudoréplica consistió de una búsqueda con la misma configuración de las búsquedas generales. Se determinó que una búsqueda era suficiente por réplica bootstrap porque las 40 búsquedas generales encontraron árboles con verosimilitud muy similar (< 1 unidad de diferencia).

RESULTADOS

Relaciones filogenéticas

PartitionFinder seleccionó un esquema de 11 particiones (Tabla 1). La filogenia (Figs. 1A y 1B) muestra un alto soporte (bootstrap = 100) para la monofilia del género Chiasmocleis (sensuPeloso et al., 2014). Chiasmocleis está conformado por dos clados con alto soporte. El primero corresponde a especies asignadas al género Syncope por de Sá et al. (2012). El segundo incluye a las demás especies de Chiasmocleis. En adelante nos referiremos al primer clado como “clado C. hudsoni”.

Relaciones filogenéticas de Microhylidae mostrando la ubicación de Chiasmocleis parkeri sp. nov. Árbol de máxima verosimilitud obtenido bajo 11 particiones con GARLI 2.0 (lnL = -49933.8). Los números en las ramas son valores de bootstrap no-paramétrico (a partir de 100 pseudoréplicas de búsquedas de máxima verosimilitud). El nombre de la especie está seguido por el número de museo del individuo o serie de campo. Luego se indica el número de accesión GenBank para una de las secuencias de ese individuo. La raíz se ubicó en base a las especies no mostradas Tomopterna tuberculosa (Pyxicephalidae) y Lithobates sp. (Ranidae).

FIGURA 1A:: Relaciones filogenéticas de Microhylidae mostrando la ubicación de Chiasmocleis parkeri sp. nov. Árbol de máxima verosimilitud obtenido bajo 11 particiones con GARLI 2.0 (lnL = -49933.8). Los números en las ramas son valores de bootstrap no-paramétrico (a partir de 100 pseudoréplicas de búsquedas de máxima verosimilitud). El nombre de la especie está seguido por el número de museo del individuo o serie de campo. Luego se indica el número de accesión GenBank para una de las secuencias de ese individuo. La raíz se ubicó en base a las especies no mostradas Tomopterna tuberculosa (Pyxicephalidae) y Lithobates sp. (Ranidae).

Continuación de la figura 1A.

FIGURA 1B:: Continuación de la figura 1A.

Chiasmocleis parkeri sp. nov. pertenece al clado C. hudsoni. Está cercanamente relacionada a C. antenori, C. carvalhoi, C. magnova y C. tridactyla, especies caracterizadas por tener tres dedos en las manos. La distancia genética no corregida (gen 16S) entre C. parkeri sp. nov. y sus especies más cercanas es 4.9% para S. carvalhoi (KU 215720) y de 4.8 a 7.8% para C. antenori (QCAZ 56275 y QCAZ 38719). La alta divergencia genética de Chiasmocleis parkeri sp. nov. y su marcada diferenciación morfológica (ver abajo) demuestran que es una especie nueva. A continuación presentamos su descripción.

Sistemática

Chiasmocleis parkeri sp. nov. (Fig. 2)

Holotipo de Chiasmocleis parkeri (MEPN 14223, macho adulto 14.93 mm LRC, Sachavaca-Naranjilla, Provincia Zamora Chinchipe. Foto: J. Brito.
FIGURA 2:: Holotipo de Chiasmocleis parkeri (MEPN 14223, macho adulto 14.93 mm LRC, Sachavaca-Naranjilla, Provincia Zamora Chinchipe. Foto: J. Brito.

Chiasmocleis sp. Almendáriz, Simmons, Brito & Vaca-Guerrero. 2014. Amphib. Reptile Conserv. 8(1):45-64. Tabla 2.

Holotipo: MEPN 14223, macho adulto colectado por Jorge Brito y M. Jima, el 4 de agosto de 2011. El holotipo está depositado en el Museo de Historia Natural Gustavo Orcés del Instituto de Ciencias Biológicas de la Escuela Politécnica Nacional del Ecuador.

Localidad tipo: Sachavaca-Naranjilla (03°43’55.64”S; 78°29’14.18”O, 1.395 msnm), Yantzaza, Los Encuentros, Zamora Chinchipe, Ecuador.

Paratopotipo: MEPN 14219, hembra adulta, colectada con el holotipo.

Paratipos: MEPN 12678 hembra adulta, colectada por J. Vaca-Guerrero, MEPN 13257 y 13264 machos adultos colectados por J. Brito, L. González y J. Hurtado, en Colibrí (03°45’39.30”S; 78°30’9.21”O, 1.377 m); MEPN 13680, hembra adulta colectada por A. Almendáriz y J. Vaca-Guerrero en la vía Pindal-Colibrí (03°45’15.56”S; 78°33’18.83”O, 1.224 m); MEPN 13268 hembra adulta colectada por J. Brito y J. Hurtado en San Antonio (03°50’35.6”S; 78°31’53.64”O, 1.505 msnm); MEPN 14618, 14620, 14621-22, 14624-25, machos adultos colectados por A. Almendáriz, J. Brito, P. Cumbicus en La Zarza (03°47’7.85”S; 78°29’8.16”O, 1.600-1.630 msnm), las localidades corresponden al cantón Yantzaza, parroquia Los Encuentros, provincia Zamora Chinchipe; QCAZ 41441, macho joven, colectado por Silvia Aldás y Angel Jiménez (04°15’18.83”S; 78°40’23.30”O, 1.300 msnm) Las Orquideas, cantón Nangaritza, parroquia Zurmi, Provincia Zamora Chinchipe; QCAZ 41608 macho joven, colectado por Silvia Aldás (04°15’22.61”S; 78°37’20.10”O, 1.290 msnm) Miazi Alto, cantón El Pangui, parroquia El Guisme, Provincia Zamora Chinchipe.

Diagnóstico

Por su posición filogenética, (Figs. 1A y 1B) asignamos la especie nueva al género Chiasmocleis. Chiasmocleis parkeri es una especie pequeña (Fig. 2), LRC en machos 14.23-16.51 mm (N = 9); hembras 15.29-17.07 mm (N = 3), ver Tabla 3; cuerpo ovoide, ligeramente alargado; cabeza pequeña 29% LRC (N = 12) y un poco más estrecha que el ancho del cuerpo; en vista dorsal hocico truncado, subelíptico en vista lateral; la mandíbula superior se proyecta notablemente sobre la inferior. Tímpano visible, 57% del diámetro del ojo (N = 12). En la mano se distinguen externamente tres dedos, con rebordes cutáneos, discos redondeados y leve membrana basal, particularmente en las hembras. Externamente el dedo I está oculto y aparenta un abultamiento (Fig. 3A), notorio en el individuo diafanizado y teñido con alizarina (Fig. 4A). Se distinguen los tubérculos subarticulares proximales en los dedos II, III y IV y un tubérculo subarticular medio en el dedo III. La longitud del dedo IV alcanza el borde anterior del tubérculo subarticular proximal del dedo III; tubérculos tenar y palmar presentes en todos los individuos; longitud relativa de los dedos II<III>IV. Cuatro dedos distinguibles externamente en los miembros posteriores, el dedo I oculto (Fig. 3B), visible en ejemplar diafanizado (Fig. 4B), dedos con ligero reborde cutáneo, sin rastros de membrana; tubérculos subarticulares proximales son distinguibles en los dedos II, III, IV y V; en los dedos III y IV se observa un tubérculo subarticular penúltimo. El dedo II supera el borde anterior del tubérculo subarticular proximal del dedo III; dedo III alcanza el borde anterior del tubérculo subarticular penúltimo del dedo IV; el dedo V no alcanza el borde anterior del tubérculo subarticular proximal del dedo IV; dedos pediales II, III, IV y V con discos redondeados. El tubérculo metatarsal interno se ubica en la base del dedo I que se halla oculto. Se distinguen pocas espinas dermales dispersas en la sección medio dorsal del cuerpo. Los cantos están conformados por notas sin pulsos.

TABLA 3::
Medidas de la serie tipo de Chiasmocleis parkeri en mm, promedio y desviación estándar en paréntesis. Abreviaciones: LRC (largo: rostro cloaca); LCA (longitud de la cabeza); ACA (ancho de la cabeza); DOJ (diámetro del ojo); DIO (distancia interorbital); DIN (distancia internarial); DON (distancia ojo-nostril); LMU (longitud del muslo); LTI (longitud de la tibia); LPI (longitud del pie), ADIV (ancho del disco del dedo IV pedal).
  MEPN MEPN QCAZ QCAZ MEPN MEPN MEPN MEPN MEPN MEPN MEPN MEPN MEPN MEPN MEPN    
14223 14618 41608 41441 12678 13257 13264 13268 13680 14219 14620 14621 14622 14624 14625    
(HOLOTIPO) (JUVENIL) (JUVENIL) (JUVENIL) (n = 3) (n = 9)
LRC 14.93 12.6 12.17 12.20 15.29 15.5 16.51 17.07 14.23 16.42 14.23 15.37 15.10 16.38 14.67 15.29 - 17.07 (16.26 ± 0.9) 14.23 - 16.51 (15.21 ± 0.83)
LCA 4.46 4.03 4.17 4.90 4.74 4.62 4.78 4.59 4.40 4.52 4.54 4.14 4.10 4.42 4.40 4.52 - 4.74 (4.62 ± 0.11) 4.10 - 4.78 (4.43 ± 0.21)
ACA 5.06 4.46 4.25 4.51 5.30 4.69 5.32 5.27 4.93 5.15 4.96 4.83 4.69 5.07 5.19 5.15 - 5.30 (5.24 ± 0.08) 4.69 - 5.32 (4.97 ± 0.21)
DOJ 1.48 1.47 1.40 1.43 1.47 1.82 1.67 1.73 1.29 1.52 1.39 1.56 1.65 1.67 1.47 1.47 - 1.73 (1.57 ± 0.14) 1.29 - 1.82 (1.56 ± 0.16)
DIO 2.71 2.40 2.29 2.47 2.60 2.77 3.07 2.84 2.35 2.65 1.90 2.55 2.78 2.8 2.66 2.60 - 2.84 (2.70 ± 0.13) 1.90 - 3.07 (2.62 ± 0.33)
DIN 1.31 1.19 1.20 1.21 1.34 1.28 1.43 1.35 1.09 1.33 1.39 1.27 1.43 1.34 1.37 1.33 - 1.35 (1.34 ± 0.01) 1.09 - 1.43 (1.32 ± 0.11)
DON 1.25 1.15 0.96 1.18 1.26 1.01 1.18 1.12 1.01 1.11 0.95 1.14 1.26 1.11 1.12 1.11 - 1.26 (1.16 ± 0.08) 0.95 - 1.26 (1.11 ± 0.11)
LMU 6.22 5.84 5.30 5.92 6.18 6.16 7.09 7.09 6.36 7.07 6.22 6.19 5.66 6.22 6.70 6.18 - 7.09 (6.78 ± 0.52) 5.66 - 7.09 (6.31 ± 0.39)
LTI 6.73 5.83 5.51 5.72 6.59 6.56 6.86 7.28 6.45 6.26 6.34 6.37 6.45 6.69 6.59 6.26 - 7.28 (6.71 ± 0.52) 6.34 - 6.86 (6.56 ± 0.18)
LPI 10.96 9.54 8.06 9.08 11.72 10.03 12.22 12.55 10.39 10.68 10.50 10.79 11.08 11.52 10.04 10.68 - 12.55 (11.65 ± 0.94) 10.03 - 12.22 (10.84 ± 0.71)
AD-IV 0.56 0.45 0.39 0.37 0.61 0.42 0.44 0.64 0.46 0.63 0.51 0.60 0.48 0.53 0.60 0.61 - 0.64 (0.63 ± 0.02) 0.42 - 0.60 (0.51 ± 0.07)

Morfología palmar (A) y plantar (B) de Chiasmocleis parkeri (Holotipo MEPN 14223, macho adulto). Fotos: J. Vaca-Guerrero.
FIGURA 3:: Morfología palmar (A) y plantar (B) de Chiasmocleis parkeri (Holotipo MEPN 14223, macho adulto). Fotos: J. Vaca-Guerrero.

Anatomía de la mano (A) y pie (B) de Chiasmocleis parkeri, ejemplar diafanizado (MEPN 14219, hembra adulta 16.42 mm LRC).
FIGURA 4:: Anatomía de la mano (A) y pie (B) de Chiasmocleis parkeri, ejemplar diafanizado (MEPN 14219, hembra adulta 16.42 mm LRC).

Comparaciones

La especie nueva forma parte del clado Chiasmocleis hudsoni, conformado por: C. antenori, C. carvalhoi, C. haddadi, C. hudsoni, C. magnova y C. tridactyla (sensuPeloso et al., 2014). Los caracteres que diferencian a estas especies se expresan en paréntesis. Chiasmocleis parkeri es muy parecido a C. antenori por la presencia de tímpano, ausencia de dientes vomerinos, tres dedos manuales y cuatro pedales visibles externamente, el dedo I de manos y pies se halla oculto bajo la apariencia de un abultamiento y el dedo IV es rudimentario. Chiasmocleis parkeri difiere de C. antenori por la presencia de los tubérculos subarticulares bajo la fórmula 1-2-1 (palmas lisas), C. parkeri tiene membrana basal en los dedos de las manos y ausente en los dedos pedales (carece de membrana basal). La coloración dorsal de C. parkeri varía de café ladrillo a marrón con diminutos puntos crema-blanquecinos diseminados en todo el cuerpo, el vientre es más claro que el dorso o grisáceo con puntos blanquecinos un poco más grandes que los del dorso (dorso café obscuro apagado con pequeñas manchas blancas y el vientre café grisáceo con pequeñas manchas azuladas). En C. parkeri el patrón de coloración es uniforme y no se distingue una línea cantal blanca (a veces presente). El iris es dorado-amarillento en C. parkeri (anaranjado-rojo).

Chiasmocleis parkeri es notablemente más grande que C. carvalhoi, LRC 14.9 mm en machos (9.4 mm); los dedos manuales II y IV reducidos (dedos manuales II y IV de igual tamaño y muy reducidos). En C. parkeri el vientre está cubierto por diminutos puntos claros (manchas blancas o crema).

Chiasmocleis parkeri difiere de C. haddadi en que los dedos I: manual y pedial no son visibles (las cuatro extremidades con dedos evidentes); vientre de color uniforme cubierto por diminutos puntos claros (vientre reticulado).

Chiasmocleis parkeri se distingue de C. hudsoni porque el hocico es recto en vista dorsal (truncado), subelíptico en vista lateral (redondeado en vistas dorsal y lateral); el dedo manual I oculto (visible). En C. parkeri el vientre está cubierto por diminutos puntos claros (generalmente sin pigmentación, excepto la garganta).

Chiasmocleis parkeri es claramente diferenciable de C. magnova por la presencia de tubérculos palmares (ausentes); el dedo manual I oculto (visible); longitud relativa de los dedos manuales II<III<IV (I<IV<II<III).

Chiasmocleis parkeri difiere de C. tridactyla por la presencia de tres dedos manuales evidentes y cuatro pedales (tres dedos en manos y pies, dedos manuales II y IV de igual tamaño y notablemente reducidos). En C. parkeri el dorso y parte del vientre están cubiertos por diminutos puntos claros (dorso café con muy pocas manchas, vientre con numerosas manchas agrandadas).

Descripción del Holotipo

Macho adulto (14.93 mm LRC), cuerpo ovoide, poco robusto y ligeramente alargado; cabeza pequeña con relación al resto del cuerpo (29.9% del LRC), más ancha que larga (113% entre ACA/LCA); hocico recto (truncado) en vista dorsal y subelíptico en vista lateral; las aberturas nasales no son levantadas y están dispuestas en posición anterolateral. La relación distancia interorbital/distancia internarial es 2.1 veces. El canto rostral ligeramente inclinado; la región loreal tenuemente convexa. El diámetro del ojo equivale a ⅓ del largo de la cabeza. Sin pliegues occipitales o supratimpánicos. El tímpano es visible, redondeado, su diámetro corresponde al 62% de DOJ. Las aberturas nasales en posición más cercana al hocico que al ojo. La mandíbula superior se proyecta sobre la inferior; la lengua es recta en el margen inferior, aplanada y redondeada en el margen posterior, libre en los márgenes laterales; las coanas pequeñas de forma ovalada, muy separadas una de otra; no se distinguen los sacos vocales y están ausentes los dientes vomerinos.

Brazos delgados; el dedo I oculto, externamente toma la forma de un abultamiento, dedos II, III y IV visibles externamente. Las puntas de los dedos redondeadas, con presencia de discos. Leve membrana basal entre los dedos II y III, III y IV. Longitud relativa de los dedos: II<III>IV. Únicamente en los dedos II y III se distinguen los tubérculos distales y en el III el tubérculo proximal; se observa un tubérculo palmar redondeado. Hay pocas espículas dermales dispersas en la mitad del dorso. Dedo II levemente más largo que el dedo IV, alcanzando el borde inferior del tubérculo subarticular intermedio del dedo III, dedo IV alcanza el borde superior del tubérculo subarticular proximal del dedo III; dedo III notablemente más largo que II y IV.

Extremidades posteriores (160% del LCR), robustas, plantas relativamente lisas, son poco visibles los tubérculos subarticulares proximales de los dedos II, III, IV y V y los tubérculos subarticulares distales de los dedos III y IV; el dedo IV notablemente desarrollado; ausencia de membrana entre los dedos del pie; dedo I oculto; dedo II alcanza el tubérculo subarticular distal del dedo III; se aprecia el tubérculo metatarsal interno alargado, en posición basal al dedo I, el cual está oculto. Longitudes relativas de los dedos del pie II<III<IV>V, dedo V más pequeño y más delgado que II y IV. Discos terminales redondeados en los dedos pediales, excepto en el dedo V. Piel del dorso y vientre de textura lisa, levemente arrugada en la mitad del dorso.

Medidas del Holotipo (mm)

LRC 14.93, LCA 4.46, ACA 5.06, DOC 1.48, DIO 2.71, DIN 1.31, DON 1.25, LMU 6.22, LTI 6.73, LPI 10.96, ADIV 0.56.

Coloración en vida

Dorso con un color que varía entre ladrillo (36) y granate (39) y cubre el cuerpo en su totalidad; con diminutos puntos blanco-amarillento dispersos, los cuales llegan hasta los flancos. El vientre liso, más claro que el dorso, color café siena (32), con pequeños puntos blanquecinos cubriendo, la garganta, barriga, superficies internas de las extremidades e inclusive las manos y pies. A lo largo de los dedos la coloración se hace más clara. El iris es dorado-amarillento y la pupila negra (Fig. 2).

Coloración en preservante

Cuerpo dorsalmente color sepia (4), sin manchas blanquecinas o amarillentas. Hacia las extremidades incluyendo la superficie dorsal de manos y pies la coloración se atenúa a un color siena (38) en donde se distinguen puntos finos y manchas pequeñas redondeadas de color ámbar (23). El vientre color ámbar (23) tornándose más obscuro hacia la garganta, se notan manchas y puntos decolorados dispersos en todo el vientre, alcanzando los flancos, la pantorrilla y el pie; las palmas de las manos y plantas de los pies beige-amarillento (5), los discos de los dedos blanquecinos (Fig. 5).

Coloración en preservante: Morfología dorsal y ventral de Chiasmocleis parkeri (MEPN 14223, holotipo preservado, macho adulto, 14.93 mm LRC). Fotos: V. Carvajal y J. Vaca-Guerrero.
FIGURA 5:: Coloración en preservante: Morfología dorsal y ventral de Chiasmocleis parkeri (MEPN 14223, holotipo preservado, macho adulto, 14.93 mm LRC). Fotos: V. Carvajal y J. Vaca-Guerrero.

Variación: En algunos individuos la coloración dorsal se obscurece hasta un color sepia (4) con finas salpicaduras de color blanco-amarillento (Fig. 6). A nivel morfométrico la especie no presenta dimorfismo sexual estadísticamente significativo; sin embargo, los machos (LRC x ¯ = 14.69, N = 11) son relativamente más pequeños que las hembras (LRC x ¯ = 15.66, N = 3) y la proporción ACA/LCA también es relativamente mayor en las hembras ( x ¯ = 118%, N = 3) que en los machos ( x ¯ = 111%, N = 11); los machos presentan la garganta más obscura que el resto del vientre, mientras que en las hembras el patrón de coloración es uniforme (Fig. 7).

Chiasmocleis parkeri, variación de color en vida, hembra adulta MEPN 14219.
FIGURA 6:: Chiasmocleis parkeri, variación de color en vida, hembra adulta MEPN 14219.

Variación en preservado del patrón de coloración dorsal y ventral de Chiasmocleis parkeri. Paratipos: (A) MEPN 12678 y (B) MEPN 13268 (hembras adultas), (C) MEPN 13257 y (D) MEPN 13264 (machos adultos), (E) QCAZ 41608 (macho juvenil).
FIGURA 7:: Variación en preservado del patrón de coloración dorsal y ventral de Chiasmocleis parkeri. Paratipos: (A) MEPN 12678 y (B) MEPN 13268 (hembras adultas), (C) MEPN 13257 y (D) MEPN 13264 (machos adultos), (E) QCAZ 41608 (macho juvenil).

Distribución e Historia Natural

Chiasmocleis parkeri proviene de la región meridional de las laderas orientales de la cordillera de los Andes y de los flancos occidentales de la Cordillera del Cóndor, provincia Zamora Chinchipe, Ecuador (Fig. 8). Los ejemplares de la serie tipo fueron colectados tanto en el día como en la noche, a nivel del suelo, ocultos entre la hojarasca o bamba de bosques primarios o poco intervenidos. Los machos vocalizan esporádicamente en la noche y en el día, el macho MEPN 14223 fue localizado muy cerca de la hembra MEPN 14221, a menos de 0.5 m, y respondía positivamente al playback de la grabación. Desconocemos datos sobre la postura y el desarrollo de larvas. MEPN 14219 hembra grávida y disectada contenía 4 huevos bicoloreados y en MEPN 14220 (macho adulto) se observó testículos de forma ovoide y color crema, siendo 2.3 veces más largo que ancho (Largo = 0.60 mm; Ancho = 0.26 mm; Perímetro = 1.72 mm).

Ubicación de las localidades de registro de Chiasmocleis parkeri.
FIGURA 8:: Ubicación de las localidades de registro de Chiasmocleis parkeri.

Al parecer Chiasmocleis parkeri tiene una dieta especializada en hormigas. En MEPN 14223 se encontró 6 individuos de Labidus spininodis y restos del género Neoponera, en MEPN 14219 se halló ocho individuos del género Pleidole.

Etimología

El nombre hace referencia al ornitólogo Ted Parker III (†) quien promovió la expedición a la Cordillera del Cóndor en 1991, organizada por Conservación Internacional e instituciones nacionales y constituyó su último trabajo de campo antes de su fatal deceso en las montañas de Manglar Alto, Santa Elena, Ecuador (3 de agosto de 1993).

Cantos

Se analizó un total de 72 notas de un canto del ejemplar MEPN 14223, grabado el 4 de agosto de 2011 por J. Brito y M. Jima, a una temperatura de 19.5°C y 68% de humedad.

Chiasmocleis parkeri, presenta un canto de frecuencia modulada, cuya frecuencia dominante es de 3.96-4.09 kHz ( x ¯ = 4.04 ± 0.03); de una duración de 14.78 s, conformada por 72 notas sin pulsos, las cuales presentan una duración de 5-10 ms ( x ¯ = 7.36 ± 1.07), con intervalos de 151-270 ms ( x ¯ = 184.50 ± 22.42), emitiendo 3.59-6.25 notas/segundo ( x ¯ = 5.24 ± 0.53, Fig. 9). El llamado de Chiasmocleis parkeri, es muy parecido a un golpeteo metálico.

Oscilogramas y sonogramas de un llamado de advertencia de Chiasmocleis parkeri (Holotipo MEPN 14223).
FIGURA 9:: Oscilogramas y sonogramas de un llamado de advertencia de Chiasmocleis parkeri (Holotipo MEPN 14223).

Comparaciones: El canto de Chiasmocleis parkeri es inusual por la carencia de pulsos, en contraste con la mayoría de cantos conocidos del género Chiasmocleis. En C. anatipes el canto (Rodríguez & Duellman, 1994) es una serie corta de notas multipulsadas, parecida a un zumbido. El canto de C. bassleri está compuesto por notas repetitivas y multipulsadas (Peloso et al., 2014). Además, la tasa promedio de emisión de notas por segundo es más alta en C. bassleri (9.47 notas/segundo) que en C. parkeri (5.24 notas/segundo) y el promedio de la frecuencia dominante es más alto en C. parkeri (4.038 Hz) que en C. bassleri (2.747 Hz) y en C. ventrimaculata (3.562 Hz, Nelson, 1973). Otras especies, que tienen reducción de dígitos (C. haddadi y C. hudsoni) también presentan un patrón similar: cantos compuestos por series repetitivas de notas multipulsadas (Peloso et al., 2014).

DISCUSIÓN

Sistemática

Nuestra filogenia es la primera en encontrar un alto soporte (bootstrap = 96) para el clado compuesto por las especies asignadas al género Syncope por de Sá et al. (2012). El clado incluye a: C. antenori, C. bassleri, C. carvalhoi, C. haddadi, C. hudsoni, C. magnova, C. parkeri, y C. tridactyla (Figs. 1A y 1B). de Sá et al. (2012) encontraron el mismo clado con bajo soporte (bootstrap < 70) y con un menor muestreo de especies y transfirieron a C. bassleri, C. hudsoni, C. magnova, y C. supercilialbus al género Syncope. Posteriormente, Peloso et al. (2014) recuperaron a Syncope como parafilético puesto que C. bassleri aparecía como especie hermana a todas las especies de Chiasmocleis (incluyendo Syncope sensude Sá et al., 2012); a pesar que la posición de C. bassleri tenía un soporte bootstrap bajo, los autores sinonimizaron a Syncope bajo Chiasmocleis (Peloso et al., 2014).

En favor de la estabilidad taxonómica, nos abstenemos de resucitar el género Syncope y en su lugar, nombramos al clado C. hudsoni como una categoría sin rango taxonómico que incluye las especies descendientes del ancestro común más cercano de C. bassleri y C. parkeri. La reciente inestabilidad taxonómica dentro del clado C. hudsoni ejemplifica un problema recurrente en las revisiones taxonómicas: se proponen cambios genéricos para “solucionar” problemas de parafilia a pesar de que el soporte de los nodos que la generan es bajo. Un soporte nodal bajo indica que no se puede rechazar estadísticamente la monofilia de los géneros en cuestión. Por lo tanto, cambios taxonómicos que involucran nodos con bajo soporte con frecuencia son precedidos rápidamente por cambios adicionales que generan a su vez más inestabilidad. Los cambios de género propuestos por de Sá et al., (2012) y Peloso et al., (2014) para especies del clado C. hudsoni dan una muestra de este problema. La filogenia de de Sá et al., (2012) mostraba que Chiasmocleis era parafilético con respecto a Syncope. Sin embargo, el soporte para esa parafilia era bajo (< 70 para el clado C. hudsoni) por lo que no se podía rechazar estadísticamente la monofilia de Chiasmocleis. Por ello, los cambios de género propuestos por de Sá et al., (2012) no tenían justificación estadística. Lo mismo sucedió con los cambios propuestos por Peloso et al., (2014) dentro del mismo clado.

La especie con posición más inestable dentro de este clado ha sido C. bassleri. Su clado hermano difiere entre todas las filogenias publicadas recientemente (de Sá et al., 2012, Peloso et al., 2014, Peloso et al., 2015). En nuestra filogenia aparece como especie hermana de C. haddadi y C. hudsoni aunque con bajo soporte. Es llamativo que Peloso et al. (2015) reportan un alto soporte para la exclusión de C. bassleri del clado C. hudsoni mientras que nosotros encontramos un alto suporte para su inclusión. Estos resultados aparentemente incongruentes podrían explicarse por diferencias metodológicas. Los análisis bootstrap de Peloso et al. (2015) aplicaron una tasa de eliminación del 36%, menor que el valor estándar de 50% empleado en nuestros análisis.

En nuestra filogenia, varias especies de Chiasmocleis son parafiléticas o polifiléticas sugiriendo la existencia de muestras mal identificadas o especies no descritas. Chiasmocleis antenori, por ejemplo, es parafilética con respecto a C. tridactyla (QCAZ 55408) y C. parkeri. Se requieren estudios adicionales para dilucidar el estatus de las muestras problemáticas, particularizando en las especies miniaturizadas (C. antenori, C. carvalhoi, y C. tridactyla).

Los cantos de la mayoría de especies que conforman el género Chiasmocleis, con o sin reducción de dígitos, se caracterizan por notas multipulsadas, a excepción de C. mantiqueira (Peloso et al., 2014; Santana et al., 2012) cuyas notas carecen de pulsos. Caso similar se presenta en C. parkeri y constituiría la segunda especie con este patrón, en la estructuración de pulsos para el género. Los cantos estructurados por series repetitivas de notas multipulsadas de las especies del género Chiasmocleis, pueden considerarse un carácter sinapomórfico (Peloso et al., 2014).

Compartimos la hipótesis de Santana et al. (2012), que la ausencia de sacos y aberturas vocales podrían influir en la estructura de las vocalizaciones sin pulsos; sin embargo, los autores también aducen que la ausencia de sacos vocales y señales vocales a gran distancia podrían estar asociadas a modelos de reproducción explosivos en cuerpos de agua permanentes, situación que no se ajusta a las observaciones realizadas para C. parkeri. Es necesario incrementar la investigación de los cantos de Chiasmocleis (desconocidos en la mayoría) para entender la evolución de sus características acústicas.

Con relación al comportamiento reproductivo, los machos de Chiasmocleis parkeri cantan en solitario y no se ha observado congregación de machos en época de cortejo, como sucede en C. royi y C. shudikarensis (Peloso et al., 2014). El muy bajo número de huevos encontrados en la hembra MEPN 14219, sugiere que C. parkeri podría tener desarrollo directo, como fue propuesto para C. magnova (Moravec & Köhler, 2007). Adicionalmente, en las diversas campañas de campo se revisaron bromelias terrestres y arbóreas, en busca de posturas o larvas de C. parkeri, encontrándose únicamente larvas de Excidobates condor (observaciones de A. Almendáriz y colaboradores).

En cuanto a la utilización del hábitat, Chiasmocleis parkeri es el único microhílido que habita en los tepuyes de la zona suroriental de Ecuador, en donde dominan musgos, raíces y fitotelmatas. La pendiente pronunciada y el tipo de suelo no facilitan la acumulación de lluvias en pozas temporales o permanentes que permitan el desove y el desarrollo de larvas acuáticas exotróficas en aguas lénticas.

El presente trabajo cumple con el planteamiento de Peloso et al. (2014) de intensificar los estudios de microhylidos para describir especies nuevas, establecer diferencias bioacústicas y ampliar los conocimientos sobre la variación morfológica y el comportamiento reproductivo del grupo.

Acknowledgements

AGRADECIMIENTOS

Ana Almendáriz, Jorge Brito y Jorge Vaca agradecen a las Empresas Kinross y Cardno-Entrix, por las facilidades brindadas mientras se realizaron las evaluaciones faunísticas en el Alto Río Machinaza, bajo contrato de la Empresa Cardno-Entrix a favor de la Escuela Politécnica Nacional. Santiago Ron agradece a la Secretaría de Educación Superior, Ciencia, Tecnología e Innovación (SENESCYT) por el financiamiento para el trabajo de laboratorio en el marco de la Iniciativa Arca de Noé. Gabriela Castillo extrajo y amplificó el ADN de las muestras secuenciadas. Nuestro reconocimiento a Fernando Ayala del QCAZ-PUCE y a Carolina Reyes del MECN por facilitar la revisión de ejemplares; a Adrián Troya por la identificación de los contenidos estomacales; a Daniel Rivadeneira por su asistencia en la corrección del manuscrito; a los revisores anónimos por sus valiosas sugerencias para mejorar el manuscrito; a P. Peloso por la identificación de A. tridactyla (QCAZ 55408) de Tambococha, Ecuador y a John Simmons por su ayuda en la traducción del resumen. Las colecciones tuvieron el respaldo del permiso Nº 026-IC-FAU-DBAP-VS-DRLZCH-MAE otorgado por el Ministerio del Ambiente.

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Editor Responsável: Marcelo Duarte

APENDICE I

Especímenes examinados

Chiasmocleis anatipes (ECUADOR): Prov. Pastaza, Pozo petrolero Misión: MEPN 306.

Chiasmocleis antenori (ECUADOR): Prov. Morona Santiago, Río Llushin: MEPN 12636. Provincia Napo, Jatun Sacha: DHMECN 1384-1395. Prov. Pastaza: Pozo petrolero Villano B: QCAZ 38506, 38561, 38760, 38787, 56275.

Chiasmocleis bassleri (ECUADOR): Prov. Napo, Guamaní: MEPN 8178. Prov. Orellana, Plataforma Tivacuno: MEPN 10629-10630. Prov. Pastaza, Chuyayacu: MEPN 7428; Pozo Petrolero Misión: MEPN 307.

Chiasmocleis tridactyla (ECUADOR): Prov. Francisco de Orellana, Tambococha: QCAZ 55408.

Chiasmocleis ventrimaculata (ECUADOR): Provincia Sucumbíos, Río Pañayacu: MEPN 12912; Playas de Cuyabeno: DHMECN 8646; Putumayo, Puerto Rodríguez: DHMECN 8677-80, 8683, 8387.

Chiasmocleis sp. (ECUADOR): Prov. Francisco de Orellana, Pozo petrolero OBE: MEPN 6518; Pozo petrolero Nashiño: MEPN 7315, 7316; Cotapino: MEPN 7483; Prov. Napo, Pozo petrolero Yuralpa D: MEPN 13616.

APENDICE II

Material secuenciado

Chiasmocleis antenori (ECUADOR): Prov. Pastaza, Villano: QCAZ 38719 y 56275.

Chiasmocleis parkeri sp. nov. (ECUADOR): Prov. Zamora Chinchipe, Yantzaza: MEPN 14223 y Nangaritza: QCAZ 41441.

Chiasmocleis tridactyla (ECUADOR): Prov. Francisco de Orellana, Tambococha: QCAZ 55408.